臨床醫(yī)學檢驗考試復習-培養(yǎng)基的組成成分
來源:易賢網(wǎng) 閱讀:799 次 日期:2016-08-12 14:04:55
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培養(yǎng)基的組成成分包括三大類:營養(yǎng)物質、凝固物質、抑制劑和指示劑。

(一)營養(yǎng)物質

盡管不同的細菌對營養(yǎng)的要求不同,但細菌需要的營養(yǎng)物質應含有水、氮源、碳源、無機鹽類和生長因子等,常用的營養(yǎng)物質如下:

1.蛋白胨:蛋白胨是制備培養(yǎng)基時最常用的成分之一,提供細菌生長繁殖所需要的氮源。是動物或植物蛋白質經(jīng)酶或酸堿分解而成。植物胨和動物胨各有優(yōu)點,配制培養(yǎng)基常將兩者按一定比例混合使用,提高培養(yǎng)基的營養(yǎng)價值。蛋白胨易溶于水,遇酸不沉淀,不因受高溫而凝固,并為兩性電解質有緩沖作用。但吸水性強,應注意干燥密封保存。

2.肉浸液:是用新鮮牛肉浸泡、煮沸而制成的肉汁。其中含有可溶性含氮浸出物(肌酸、黃嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤核苷酸、谷氨酸、甘氨酸等)和非含氮浸出物(肝糖、乳酸、琥珀酸、磷酸己糖、脂肪、無機鹽類等)。還有一些生長因子。肉浸液可為細菌提供氮源和碳源,但肉浸液中所含氮物質過少而不能滿足細菌的需要,因此在制備培養(yǎng)基時應再加入1%~2%的蛋白胨和0.5%氯化鈉。

3.牛肉膏:由肉浸液經(jīng)長時間加熱濃縮而制成。糖類在加熱過程中被破壞,所以其營養(yǎng)價值低于肉浸液,但因無糖可用作腸道桿菌鑒別培養(yǎng)基的基礎成分。由于使用方便,常用于制備培養(yǎng)基。

4.糖類、醇類:為細菌生長提供碳源和能源。制備培養(yǎng)基所用的糖類、醇類有多種,常用的糖類有單糖(葡萄糖、阿拉伯糖等)、雙糖(乳糖、蔗糖等)和多糖(淀粉、菊糖等);常用的醇類有甘露醇、衛(wèi)茅醇等。除葡萄糖、蔗糖主要作為碳源和能源的基本成分外,其他糖類和醇類主要用于鑒定細菌所做的發(fā)酵反應。

5.血液:血液中既含有蛋白質、多種氨基酸、糖類、無機鹽類等營養(yǎng)物質,又能提供輔酶(如V因子)、血紅素(X因子)等特殊生長因子,所以培養(yǎng)基中加入血液用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細菌。另外,還可根據(jù)細菌在血液培養(yǎng)基中的溶血現(xiàn)象而進行鑒定。

6.無機鹽類:提供細菌生長的各種元素,如:鉀、鈉、鐵、鎂、鈣、磷、硫等。用于制備培養(yǎng)基的無機鹽類有多種,其中最常用的有氯化鈉和磷酸鹽,前者對維持酶的活性、調節(jié)菌體內外的滲透壓非常重要,后者是細菌良好的磷源,并在培養(yǎng)基中具有緩沖作用。

7.雞蛋和動物血清:雖然不是構成培養(yǎng)基的基本成分,但卻是某些細菌生長所必需的營養(yǎng)物質,所以僅用于制備一些特殊的培養(yǎng)基,這些細菌直接從雞蛋和動物血清中獲取營養(yǎng)。如培養(yǎng)結核分枝桿菌的雞蛋培養(yǎng)基和培養(yǎng)白喉桿菌的呂氏血清培養(yǎng)基等。

8.生長因子:是細菌生長所必需的,但需要量很小。在制備培養(yǎng)基時,常在肝浸液、肉浸液、酵母浸液和含血液培養(yǎng)基中加入維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等生長因子。

(二)凝固物質

制備固體培養(yǎng)基時,需要在液體中加入凝固物質。最常用的凝固物質為瓊脂,特殊情況下也可用明膠、卵白蛋白、血清等。

瓊脂是從石花菜中提取出來的一種半乳糖膠,當溫度達98℃以上時可溶于水,在45℃以下則凝固成凝膠狀態(tài),是一種理想的固體培養(yǎng)基賦形劑。因其不被細菌分解利用,故無營養(yǎng)作用。

(三)抑制劑和指示劑

在制備培養(yǎng)基時常加入抑制劑和指示劑,這些并不是細菌生長繁殖所必需的物質,而是由于選擇、鑒定及判斷結果的需要。

1.抑制劑:抑制劑必須具有選擇抑制作用,在制備培養(yǎng)基時加入一定種類的抑制劑,目的在于抑制非檢出菌(非病原菌)的生長,以利于檢出菌(病原菌)的生長。抑制劑的種類很多,可根據(jù)不同的目的選用不同的抑制劑。常用的有膽鹽、煌綠、亞硫酸鈉、亞硒酸鈉及一些染料和某些抗生素等。

2.指示劑:在培養(yǎng)基中加入一定種類的指示劑,是為了便于觀察細菌是否利用和分解培養(yǎng)基中的糖、醇類。常用的有酚紅、中性紅、甲基紅、溴甲酚紫、溴麝香草酚藍、中國藍等酸堿指示劑。美藍常用作氧化還原指示劑。

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